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发布时间:2020-10-19 22:52:52
***组原位杂交技术是以亲本之一的总***组DNA做探针,另一亲本的***组DNA做封阻,在荧光原位杂交的基础上发展起来的一种染色体/染色质检测技术。做***染色体***或染色体杂交分析,***组原位杂交时(检测是否有外源染色体或染色体片段),动物细胞需要制备分裂间期,中期的细胞。而植物样品则需要制备染色体制片。FISH是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末被发明,现已从实验室逐步进入临床诊断领域。***组原位杂交的原理与荧光原位杂交相同,不同的是所用的探针。***组原位杂交是以来源不同的亲本之一的总***组DNA 做探针,通过生物素,,荧光素等标记物标记后,再原位杂交到染色体制片上,接着通过与该标记物耦合的荧光素反应(标记物为荧光素则不需此步),检测该亲本染色体或染色体片段在中的存在状况;而其它亲本的***组总DNA (或非探针的其它 DNA)以一定的浓度比例来封闭染色体上探针的非特异结合位点,尽可能使染色体上的特异位点暴露出来供探针杂交。
作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。他的产生是基于对真核细胞转录因子特别是酵母转录因子GAL4性质的研究。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在***定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒分析、产前诊断、遗传学和***组研究等许多领域,在临床检验、教学和研究等方面扮演着重要的角色。
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